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新奇抑制攝食實(shí)驗(yàn)（NSFT）：評估焦慮與抑郁行為的經(jīng)典范式

一、概述
新奇抑制攝食試驗(yàn)（Novelty-Suppressed Feeding Test, NSFT）是一種廣泛應(yīng)用于神經(jīng)科學(xué)和藥理學(xué)研究的行為學(xué)范式，主要用于評估嚙齒類動物（如大小鼠）的焦慮樣行為和抑郁相關(guān)癥狀。該實(shí)驗(yàn)通過測量動物在陌生環(huán)境中接近和進(jìn)食食物的潛伏期，反映其對壓力的敏感性及興趣缺失程度。NSFT因其操作簡便、結(jié)果直觀的特點(diǎn)，已成為抗焦慮藥和抗抑郁藥療效檢測之一。




二、實(shí)驗(yàn)原理
NSFT的核心原理基于“沖突行為”模型：動物在饑餓狀態(tài)下，面對陌生環(huán)境時(shí)會產(chǎn)生趨避沖突——既渴望進(jìn)食，又因環(huán)境壓力產(chǎn)生回避行為。

  1. 焦慮評估：實(shí)驗(yàn)通過禁食增加動物對食物的需求，同時(shí)將食物置于開放式陌生環(huán)境（如明亮敞箱）的中心，形成壓力源。動物接近食物的潛伏期越長，表明其焦慮水平越高。

  2. 藥wu評價(jià)：抗焦慮藥wu可顯著縮短潛伏期，而抑郁模型動物因興趣缺乏和食欲減退，潛伏期明顯延長。


三、實(shí)驗(yàn)操作步驟

1. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

  • 動物適應(yīng)：將小鼠/大鼠單獨(dú)飼養(yǎng)1-2周，使其適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境，減少社會隔離以外的應(yīng)激干擾。

  • 禁食處理：實(shí)驗(yàn)前24小時(shí)禁食（不禁水），以激發(fā)攝食動機(jī)，但需避免超過48小時(shí)，以防過度饑餓引發(fā)異常行為。

  • 裝置設(shè)置：使用方形敞箱（推薦尺寸42 cm×31 cm×20 cm），中心放置單顆食丸（如標(biāo)準(zhǔn)飼料顆?；蚋哌m口性食物）。環(huán)境需保持明亮（約500 lux），與家籠形成鮮明對比以增強(qiáng)壓力感。

  • 可采用[曠場實(shí)驗(yàn)視頻分析系統(tǒng)，XR-XZ301，上海欣軟]

2. 測試流程

  1. 將動物背對食丸置于敞箱角落，避免直接接觸食物引發(fā)探索偏差。

  2. 啟動記錄系統(tǒng)（如VisuTrack動物行為分析軟件），開始計(jì)時(shí)。

  3. 觀察20分鐘，記錄以下關(guān)鍵事件：

    • 攝食潛伏期：從放入動物到首ci咬食的時(shí)間（秒）。

    • 接近次數(shù)：每分鐘動物靠近食物（距離<2 cm）的次數(shù)。

    • 嗅探/觸碰次數(shù)：動物接觸但不進(jìn)食的行為頻率。

3. 實(shí)驗(yàn)后處理

  • 測試結(jié)束后，將動物放回家籠并提供食物，觀察5分鐘內(nèi)進(jìn)食量以確認(rèn)饑餓狀態(tài)。

  • 清潔實(shí)驗(yàn)裝置，避免氣味殘留影響后續(xù)結(jié)果。


四、評估指標(biāo)與數(shù)據(jù)分析


  • 核心指標(biāo)：

    1. 攝食潛伏期：直接反映焦慮水平，潛伏期越長，焦慮程度越高。

    2. 行為頻率：接近、嗅探次數(shù)可輔助評估動物的探索動機(jī)與決策猶豫。

  • 軟件支持：推薦使用VisuTrack等自動化系統(tǒng)，通過視頻追蹤技術(shù)減少人為誤差，確保數(shù)據(jù)客觀性。


五、注意事項(xiàng)與優(yōu)化建議

  1. 禁食時(shí)間控制：禁食24小時(shí)為常用標(biāo)準(zhǔn)，但需根據(jù)動物品系調(diào)整。C57BL/6小鼠可能需縮短至18小時(shí)，而SD大鼠可耐受更長時(shí)間。

  2. 食物選擇：優(yōu)先使用高適口性食丸（如巧克力顆粒），或在家籠預(yù)適應(yīng)食丸3天以減少新食物排斥。

  3. 性別差異：雌性動物因發(fā)情周期影響攝食穩(wěn)定性，建議記錄發(fā)情階段或選擇雄性進(jìn)行初篩。

  4. 環(huán)境干擾：保持實(shí)驗(yàn)室安靜（噪音<50 dB），避免人員走動或突發(fā)聲響干擾行為。

  5. 晝夜節(jié)律：測試時(shí)間需與動物活動周期一致（如夜行性小鼠應(yīng)在暗周期進(jìn)行）。


參考文獻(xiàn)

1.Wu M, Li A, Guo Y, Cao F, You S, Cao J, Mi W, Tong L. GABAergic neurons in the nucleus accumbens core mediate the antidepressant effects of sevoflurane. Eur J Pharmacol. 2023 May 5;946:175627.

2.Melas PA, Wirf M, André H, Jayaram-Lindstr?m N, Mathé AA, Steensland P. The monoamine stabilizer OSU6162 has anxiolytic-like properties and reduces voluntary alcohol intake in a genetic rat model of depression. Sci Rep. 2021 Jun 4;11(1):11856.

3.Francois M, Canal Delgado I, Shargorodsky N, Leu CS, Zeltser L. Assessing the effects of stress on feeding behaviors in laboratory mice. Elife. 2022 Feb 15;11:e70271. 

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